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Em seguida contrair os sintomas, o observador desenvolve uma novidade maneira de testar os anticorpos COVID-19

Escrito por virvida

 

Kaleb Tsegay e Edward Gniffke

Membros do laboratório SEPS do Instituto de Pesquisa Infantil de Seattle, Kaleb Tsegay (à esquerda) e Edward Gniffke (à direita) estão usando o teste recém-desenvolvido para executar uma triagem inicial que pode potencialmente identificar drogas capazes de prevenir ou tratar COVID-19. Crédito: Seattle Children’s

Quando o Dr. Stephen Smith, do Instituto de Pesquisa Infantil de Seattle, começou a ter dores musculares, problemas gastrointestinais e uma súbita perda do olfato no final de fevereiro, ele suspeitou que tinha COVID-19. Os critérios de teste ainda tinham que ser expandidos para incluir indivíduos com os sintomas de Smith, logo ele fez o que muitos cientistas com sua experiência fariam: ele desenvolveu uma maneira de testar a si mesmo.

Os frutos de sua curiosidade, agora publicado em The Journal of Infectious Diseases, oferecem uma maneira confiável de quantificar se um tipo tem anticorpos neutralizantes que poderiam impedir o novo coronavírus de infectar as células usando um método que é mais amplamente aplicável do que os atualmente disponíveis.

“Se você acha que tomou COVID-19 e vai ao médico, eles podem testar seu sangue e proferir se você tem ou não anticorpos para COVID-19, mas isso não diz se seus anticorpos são bons em bloqueando funcionalmente o vírus de se vincular às células ”, disse Smith. “Existem testes no mercado que podem proferir isso, mas são caros e demoram muito para obter resultados. Queríamos desenvolver uma maneira de fornecer informações adicionais sobre o seu estado imunológico, sem todas as barreiras que o tornam difícil de usar em um envolvente comunitário. ”

O diagnóstico recém-desenvolvido pode ter uma gama de aplicações comerciais em potencial, desde testes em ampla comunidade até a avaliação das respostas às vacinas e a triagem de plasmas convalescentes que têm níveis particularmente altos de anticorpos neutralizantes uma vez que um tratamento potencial.

O teste sem células analisa as interações de proteínas

O novo coronavírus entra nas células quando a proteína do pico viral se liga à proteína ACE2 na superfície das células humanas. Acredita-se que os anticorpos neutralizantes que bloqueiam essa relação contribuam para a isenção ao vírus em pessoas que se recuperam de COVID-19.

Smith aplicou uma técnica chamada imunoprecipitação detectada por citometria de fluxo (IP-FCM) para estudar as interações entre as proteínas e buscar evidências de que os anticorpos estavam inibindo a interação e bloqueando a relação do vírus às células. Em vez de depender de células vivas e vírus uma vez que outros testes de sangue disponíveis, o IP-FCM usa proteínas e instrumentos recombinantes – ou feitos em laboratório – comumente disponíveis em laboratórios sorológicos comerciais.

“Outros testes que fornecem informações sobre a isenção funcionam ao coletar anticorpos do sangue e misturá-los com um vírus e, em seguida, expor essa mistura a células vivas. Três dias depois, eles podem ordenar a isenção com base no traje de o seu sangue ter impedido os vírus de infectar as células ou não ”, disse Smith. “Nosso teste sem células pode fornecer as mesmas informações durante a noite.”

Ciência colaborativa lança estudo inovador

Smith está entre um pequeno grupo de cientistas nos Estados Unidos que foram os pioneiros do IP-FCM no estudo das interações entre proteínas. Seu laboratório no Núcleo Infantil de Seattle para Pesquisa Integrativa do Cérebro usa o IP-FCM para deslindar novos tratamentos para o autismo, estudando as mais de 100 variações genéticas conhecidas por contribuir para a doença. Para infligir sua experiência à pandemia atual, Smith colaborou com os drs. Lisa Frenkel e Whitney Harrington do Núcleo de Pesquisa de Doenças Globais Infecciosas Globais do instituto de pesquisa que estão acompanhando uma coorte da comunidade de funcionários do Seattle Children que nunca foram hospitalizados e se recuperaram de COVID-19 ligeiro a moderado. Os pesquisadores esperam que, acompanhando sua recuperação e coletando amostras de sangue ao longo do tempo, uma vez que segmento do estudo do Seattle Children’s Recovered SARS2 Cohort, possam lançar luz sobre as respostas imunológicas ao novo coronavírus.

O financiamento em segmento do Fundo de Pesquisa COVID-19 das Crianças de Seattle ajudou Smith a projetar e lançar o estudo.

Usando o IP-FCM, Smith testou as amostras de sangue de 24 participantes da coorte. O teste mostrou que 92% dos participantes tinham anticorpos para o novo coronavírus em uma média de pouco mais de um mês depois a infecção. Os resultados foram validados com 30 amostras de controle.

“Não unicamente os participantes tinham anticorpos, mas nosso teste também mostrou que seus anticorpos eram bastante eficazes em neutralizar a relação entre a proteína spike e o receptor da célula”, disse ele. “É consistente com outros estudos de testes baseados em células que mostram que as pessoas que recebem COVID produzem anticorpos neutralizantes”.

Curiosamente, quando os pesquisadores compararam os resultados do teste com outros dados coletados na coorte, eles descobriram que aqueles que tinham febre tinham níveis mais altos de anticorpos. A equipe de pesquisa também planeja testar novamente as amostras para ver uma vez que os níveis de anticorpos mudam com o tempo.

“Será muito importante observar as pessoas por um longo período de tempo para monitorar seus níveis de anticorpos e se elas foram reinfectadas ou não”, disse Smith. “Até fazermos esses estudos, realmente não sabemos uma vez que essas medidas clínicas de neutralização de anticorpos se relacionam com a suscetibilidade no mundo real.”

Identificação de novos candidatos a medicamentos para COVID-19

Além de explorar oportunidades para comercializar o diagnóstico, Smith e sua equipe agora estão usando o teste para rastrear rapidamente milhares de medicamentos aprovados que podem interferir na relação entre o ACE2 e a proteína spike.

O gerente do laboratório, Edward Gniffke, e o estudante de graduação e estagiário de verão da Universidade de Stanford, Kaleb Tsegay, ajudaram a executar a triagem inicial que poderia potencialmente identificar drogas capazes de prevenir ou tratar COVID-19.

“Já temos alguns compostos que parecem inibir, o que é muito empolgante”, disse Smith. “Esta tela de primeira risco nos ajudará a identificar os agentes mais promissores para testes posteriores.”

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